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細(xì)胞冷凍液氮罐的具體操作步驟

瀏覽次數(shù):689發(fā)布日期:2023-09-19

  如何在液氮罐中保存大量細(xì)胞?液氮罐通常充滿低溫液氮。細(xì)胞的儲存需要低溫。將其放入-196度的液氮中,是細(xì)胞長期保存的合適環(huán)境。細(xì)胞冷凍液氮罐是將細(xì)胞儲存在液氮罐的液相中。它有一個特殊的方形抽屜提籃。將2ml冷凍儲存管放入冷凍儲存箱中,然后倒入提籃中,浸入液氮中,浸入其中。只有使細(xì)胞處于液氮-196度的環(huán)境中,細(xì)胞才能長期保存。

  細(xì)胞冷凍液氮罐的具體操作步驟:

  1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞按常規(guī)方法消化,或分離獲得原代細(xì)胞后,在離心管中收集。

  2、使用離心機離心,去除上清,收集細(xì)胞沉淀。

  3、根據(jù)細(xì)胞生長密度,加入適量的LiveCyteTM細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸,充分混合。

  4、將細(xì)胞懸液放入冷凍儲存管中,直接放入-80°C冰箱儲存。24小時后可移入液氮長期保存(可選)。

  細(xì)胞冷凍液氮罐的細(xì)胞恢復(fù)過程:

  1、從-80°從C冰箱或液氮罐中取出細(xì)胞。

  2、快速放進(jìn)37°C水浴,不時搖晃,在3分鐘內(nèi)融化。金鳳液氮罐

  3、在冷凍儲存管中加入少量培養(yǎng)液,然后將細(xì)胞混合液轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)液的離心管中。樣品與培養(yǎng)液的比例為1:10、然后輕輕吹打,攪拌均勻。

  4、離心后清除上清,收集細(xì)胞沉淀。

  5、輕輕彈性細(xì)胞沉淀,在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中加入適量培養(yǎng)液,輕輕搖晃,使細(xì)胞分布均勻,在37℃孵化器中培養(yǎng)。


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